核酸环境样本的提取流程主要包括样本采集、核酸提取、纯化及质控等步骤,需结合实验室规范操作以确保结果准确性。以下是具体方法:
环境样本通常采集高频接触表面(如门把手、桌面),使用无菌拭子蘸取病毒保存液或生理盐水反复擦拭,旋转拭子以确保充分接触。采集后立即密封标记,4℃暂存或-80℃长期保存以避免核酸降解。
1. 裂解处理:将拭子与裂解液震荡混匀,释放核酸。对于RNA病毒需加入RNA酶抑制剂防止降解。
2. 纯化方法:
若提取效率低,需检查磁珠分散性、洗涤步骤是否彻底,而非单纯增加磁珠用量。