1. 嵌入结合:染料分子通过平面结构嵌入核酸双链的碱基对之间,依赖疏水相互作用和碱基堆积力实现稳定结合。这种结合方式对双链核酸具有特异性,因单链核酸缺乏规则螺旋结构而结合较弱。
2. 静电相互作用:带正电荷的染料(如溴化乙锭)与核酸磷酸骨架的负电荷通过静电吸引结合,离子强度升高会增强此类作用。
3. 荧光特性改变:染料结合后因微环境变化(如极性降低)导致荧光增强或发射波长偏移。例如,EB-DNA复合物的荧光强度比游离EB高20-30倍。
4. 影响因素:
5. 染料类型差异:
- MIDORIGreen:新型非致癌染料,无法穿透细胞膜,适合安全实验需求。