样本采集问题
采集不规范：咽拭子/鼻拭子不足、采样时间过短或部位不准确，导致病毒载量低于检测下限。建议重新规范采样，确保拭子与黏膜充分接触。
保存液过量：病毒保存液体积过大（如常规3mL）会稀释标本，降低病毒浓度。研究表明，减少保存液体积至原1/10可提升检测灵敏度约3.32个Ct值。
检测技术限制
肿瘤细胞占比阈值：当样本中靶标（如肿瘤细胞）占比低于5%-20%时，释放的DNA量可能无法被捕获，导致假阴性。此时需采用高灵敏度检测技术或重新采样。
PCR模板浓度影响：过量模板DNA会改变酶活性、耗尽反应组分，抑制扩增效率；而模板不足则无法达到检测阈值。需严格按试剂要求控制模板量。
操作与质量控制
溶血或降解：溶血样本中白细胞破裂释放人类基因组DNA，稀释肿瘤源性DNA；高温灭活（如56℃）可能导致病毒RNA降解。建议避免反复冻融，采样后立即低温保存。
实验室污染：气溶胶或交叉污染可能引发假阳性，需通过分区操作、规范消毒和设立对照来规避。
若遇结果无效，建议联系检测机构核查样本状态，必要时重新采样并选择高灵敏度检测方案。
