1. 鼻咽拭子采集
适用于一般人群,操作时将拭子缓慢插入鼻道至鼻腭处,停留后旋转取出,需注意动作轻柔以避免黏膜损伤。儿童等特殊人群需专人安抚配合。
2. 口咽拭子采集
受检者需头部后仰并发“啊”音,拭子越过舌根在咽后壁及扁桃体处擦拭,操作需快速以减少恶心反应。
3. 其他样本类型
痰液、肺泡灌洗液或肛拭子等可根据临床需求选择,如下呼吸道样本需深咳痰液,肛拭子适用于高危人群。
1. 样本预处理
采集后的样本需低温保存(2-8℃)并及时送检,避免核酸降解。
2. 裂解与纯化
使用裂解液破坏细胞膜释放核酸,通过离心和化学试剂去除蛋白质等杂质,提取高纯度核酸。
3. 沉淀与浓缩
部分方法需加入乙酸钠和乙醇沉淀核酸,低温静置后离心获取。
采用实时荧光RT-PCR技术,通过引物和酶扩增目标核酸片段,结合荧光信号判断结果。实验室需严格质量控制,尤其儿童样本需调整参数以适应少量样本特点。
注意事项:采样前2小时避免进食,30分钟内禁烟酒;操作人员需穿戴防护装备,确保生物安全。