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核酸检测内标的定义 核酸检测内标是什么

  • 核酸检测
  • 2025-09-25 05:26
  • 来源:www.hesuanjiance.cn
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核酸检测内标(Internal Control)是指在实时荧光定量PCR(qPCR)实验中,与靶序列共同扩增的一段非靶序列分子,用于监测样本采集、核酸提取和扩增等全流程的质量控制。其核心作用是避免因实验操作或样本问题导致的假阴性结果,通过内标扩增情况判断检测体系的可靠性。

内标的主要功能

1. 流程监控:内标可监测采样、提取、扩增等环节是否正常。若内标未扩增,提示可能存在样本错加、核酸降解或试剂失效等问题。

2. 结果校正:通过内标的CT值(Cycle Threshold)校准靶基因扩增数据,提高定量准确性。

内标分类

  • 内源性内标:采用人类管家基因(如β-actin),存在于样本基因组中,可全程监控采样至扩增的所有步骤。
  • 外源性内标:人工添加的非人源序列(如假病毒),仅监控提取和扩增阶段,无法评估采样质量。
  • 异常内标的常见原因

  • 靶基因与内标均无扩增:可能为样本错加、提取试剂失效或仪器故障。
  • - 仅内标异常:提示样本中人类细胞含量不足(内源性内标)或外源性内标添加失败。

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